Большая часть вакцин, обращающихся на российском ветеринарном рынке, рассчитана на продуктивных животных. Об этом в своём докладе сообщила Светлана Яцентюк, оценив долю таких препаратов более чем в 70%. Внутри этой группы преобладают средства специфической защиты, применяемые в промышленном птицеводстве. На иммунобиологические препараты для мелких домашних животных приходится порядка 30%.
Технологические платформы
В мировой ветеринарной практике для создания вакцин используют разные технологические платформы, но основную часть биопрепаратов составляют средства на базе живых (аттенуированных) либо инактивированных штаммов вирусных и бактериальных агентов. Та же картина характерна для России: здесь тоже доминируют вакцины, содержащие живые вирусы или бактерии. Рекомбинантные ДНК-вакцины масштабного коммерческого применения в отечественной практике пока не получили и уступают традиционным биопрепаратам.
Как устроен госконтроль
Все ветеринарные вакцины проходят обязательный государственный надзор за качеством. На этапе регистрации экспертизе подвергается научно-техническое досье: в него входят параметры разработки и стандарты производства, валидация аналитических методик контроля, а также лабораторные испытания серийных образцов на безопасность и иммуногенную активность. Отдельно проверяются производственные мощности — на соответствие принципам надлежащей производственной практики (GMP). Когда препарат уже выпущен в гражданский оборот, за ним ведётся пострегистрационный фармаконадзор и мониторинг стабильности качества.
Надзорные мероприятия проводятся в соответствии с глобальными стандартами и директивами Всемирной организации по охране здоровья животных (ВОЗЖ). В аналитической работе применяются подходы, закреплённые отечественной и ведущими зарубежными фармакопеями, а также специфические методические указания, валидированные и утверждённые в составе нормативной документации на конкретную номенклатурную единицу.
Молекулярно-генетические методы
В систему оценки качества иммунобиологических средств сегодня активно включают инструменты молекулярно-генетического анализа — полимеразную цепную реакцию (ПЦР), традиционное секвенирование ДНК по Сенгеру и высокопроизводительное секвенирование нового поколения (NGS). Такие платформы позволяют верифицировать заявленные вирусные или бактериальные антигены, точно идентифицировать производственные штаммы и депонированные изоляты, а также выявлять скрытую контаминацию посторонней (адвентициальной) микрофлорой.
По словам докладчика, для внедрения этих технологий в рутинную практику недостаточно оснастить лаборатории приборами экспертного класса и привлечь компетентных специалистов. Ключевое значение имеют стандартизированные и валидированные тест-системы под конкретные аналитические задачи и доступ к референтным базам данных по полногеномному секвенированию целевых патогенов. При этом переход на молекулярно-генетический скрининг заметно сокращает время экспертизы и снижает себестоимость контрольных процедур — в том числе потому, что меньше исследований проводится с использованием лабораторных животных.
Контаминация: что находили в партиях
Отдельную часть выступления Светлана Яцентюк посвятила возможным источникам и путям контаминации биопрепаратов адвентивными микроорганизмами. В исследовательских проектах, выполненных специалистами Центра, в единичных партиях коммерческих вакцин для птицеводства фиксировали следовые объёмы нуклеиновых кислот посторонних производственных штаммов. В частности, обнаруживался генетический материал вирусов ньюкаслской болезни, оспы птиц, инфекционного ларинготрахеита и болезни Марека.
Такие скрининговые данные требовали комплексной верификации: специалисты проверяли обнаруженные агенты на репродуктивную способность (жизнеспособность) вирусологическим контролем и проводили серию тестов на безвредность конечного продукта. Расширенные испытания во всех случаях экспериментально доказали, что выявленные минорные фракции чужеродной ДНК/РНК не влияют на показатели биобезопасности вакцин.
Ставка на NGS
Среди наиболее технологичных и перспективных валидационных инструментов контроля качества биопрепаратов лидирует высокопроизводительное секвенирование нового поколения. Эта платформа мультиплексна: она охватывает верификацию целевого антигенного состава, детекцию скрытых контаминантов, мониторинг генетической однородности и стабильности вакцинного штамма при пассировании, оценку профиля качества инновационных мРНК-платформ, а также тотальный генетический скрининг клеточных линий и питательных субстратов, используемых для культивирования вирусов.
Наибольшую практическую ценность NGS показывает при аудите живых аттенуированных вакцин: метод даёт исчерпывающую картину нуклеотидного состава препарата и позволяет находить точечные мутации или геномные перестройки, которые трудно или невозможно подтвердить классическими ПЦР-тестами.
Подводя итог, Светлана Яцентюк отметила, что по мере накопления эмпирических данных, стандартизации протоколов и модернизации приборной базы NGS может войти в перечень рутинных стандартов оценки ветеринарных иммунобиологических средств. Интеграция технологии повысит дискриминационную способность и экспрессность лабораторной экспертизы, что напрямую связано с надёжностью, эффективностью и безопасностью вакцин, поступающих в оборот.