Многократность осеменений: препарируя причины

Август 2020 г.
Антон Касков
Фото Татьяны Южаниной

Распространенность проблемы многократного безрезультатного осеменения коров и телок объясняется множес-
твенностью причин организационного, физиологического и патологического характера, зачастую тесно перепле-
тенных между собой.

        О методах выявления и устранения ряда факторов, препятствующих успешному оплодотворению, рассказал кандидат ветеринарных наук, доцент кафедры хирургии, акушерства и заразных болезней факультета ветеринарной медицины ВятГСХА, научный сотрудник Института агробиотехнологий Коми научного центра Уральского отделения РАН Семён Николаев.

*    *    *

        – Многократное безрезультатное осеменение – проблема, которая встречается при работе и с коровами, и с телками. Как известно, воспроизводство является эффективным, если после первого осеменения оплодотворено 70–80% телок и 40–60% коров, после второго осеменения – 100% телок и 75–90% коров, после третьего осеменения – 100% коров.
        Вполне допустимо, что первое осеменение 20–30% коров может оказаться безрезультатным ввиду несвоевре-
менности его проведения или неполноценности первого полового цикла у того или иного животного. Как бы то ни было, если у телки после второго осеменения, а у коровы после третьего осеменения так и наступила стельность, возникает необходимость в поиске причины. И начать следует с анализа собственных действий.
        Не станем сосредоточиваться на случаях нарушения технологии осеменения – правил разморозки и введения спермодозы, – обратим внимание на то, что даже при соблюдении требований технологии осеменение может ока-
заться безрезультатным, прежде всего из-за отсутствия овуляции.
        Дело в том что у 2–10% коров рефлекс неподвижности может проявляться до наступления конца половой охо-
ты, или, напротив, общая реакция может наступать после завершения овуляции. Нередко, формальные признаки половой охоты, в том числе обильная течка, служат достаточным основанием для немедленного введения спермо-
дозы, тогда как нелишним было бы провести ультразвуковое исследование (УЗИ) яичников. Оно могло бы показать, например, что овуляция уже прошла, и живые яйцеклетки в яичнике отсутствуют.
        Необходимо допускать мысль о том, что классическая последовательность признаков стадий возбуждения полового цикла – течка, общее половое возбуждение (общая реакция), и, наконец, рефлекс неподвижности, по окончании которого проходит овуляция, – может быть нарушена. Рефлекс неподвижности у отдельных животных может проявляться на протяжении всего периода эструса.
        Такие индивидуальные особенности становятся наиболее значимыми во время замены техника-осеменатора, когда в хозяйство приходит новый специалист, еще не знакомый со стадом. Как бы то ни было, осеменение коровы без учета ее индивидуальных особенностей или без дополнительного исследования чревато неудачей и неоправдан-
ными затратами.

*    *    *

        Следующая и, пожалуй, основная причина многократных безрезультатных осеменений – наличие у животного эндометрита в скрытой (субклинической) форме, когда видимые симптомы заболевания отсутствуют, но в матке создается неблагоприятная среда для продвижения спермиев и имплантации зиготы. Распространенность субкли-
нического эндометрита велика: им страдают от 15% до 50% коров в стаде. Таким образом, заболеваемость эндоме-
тритом может представлять собой серьезную проблему для воспроизводства молочных стад.
        Существует множество способов диагностики субклинического эндометрита: УЗИ, гистологическое исследова-
ние, цитологическое исследование и различные лабораторные исследования.
        В процессе УЗИ скрытый эндометрит проявляется сглаженностью границ мышечного и слизистого слоя матки, а так же «свечением» в просвете и толще рогов матки.
        Гистологическое исследование подразумевает отбор биоптата слизистой матки, цитологическое – отбор соско-
бов эпителия с поверхности каудальной части шейки матки. Из соскобов затем делают мазки-отпечатки и микро-
скопируют их. Преобладание в соскобе нейтрофилов, особенно дегенеративных, свидетельствует о наличии у жи-
вотного воспалительного процесса.
        Лабораторные исследования разнообразны. Некоторые из них доступны ветспециалистам даже небольших сельхозпредприятий. Так, метод С.Г. Шарпа основывается на определении в течковой слизи концентрации гиста-
мина как медиатора воспаления. По методу С.Г. Шарпа на предметное стекло помещается капля течковой слизи,
на которую добавляется капля 10%-го водного раствора сахара, а через 2 минуты – капля серной кислоты.
        Окрашивание данной смеси в красно-фиолетовый цвет позволяет сделать вывод, что животное больнó эндо-
метритом в субклинической форме. Окрашивание смеси в светло-коричневый или желтый цвет свидетельствует
об отсутствии у животного субклинического эндометрита.
        По методу Ю.И. Катеринова 1 мл течковой слизи помещают в пробирку, в которую затем добавляют 4 мл дис-
тиллированной воды. Полученный раствор кипятят на спиртовке. Если раствор остался бесцветным, животное здорово, если приобрел соломенно-желтый или коричневый цвет, то у животного диагностируется эндометрит.
        Метод Н.А. Флегматова подразумевает нанесение на предметный столик капли спермы быка и добавление
в нее капли течковой слизи, рядом – нанесение нативной капли спермы для контроля, после чего препараты инкубируют до 30 минут. Гибель спермиев под воздействием течковой слизи позволяет говорить о присутствии
в ней спермотоксинов либо о ее высокой кислотности. О последней также может свидетельствовать изменение структуры течковой слизи – присутствие в ней комочков вследствие денатурации входящего в ее состав белка муцина из-за увеличения в течковой слизи кислотных оснований на фоне воспалительного процесса.
        Лечение субклинического эндометрита непременно должно сопровождаться работой над повышением естественной резистентности организма животного, чтобы добиться от него эффективной борьбы с инфекцией после искусственного обострения хронического воспаления.
        Хорошие результаты обострения хронической формы в рамках схемы лечения достигаются применением йоди-
стых препаратов, таких как «Монклавит» и «Йодинол», однако следует помнить: данные препараты негативно сказы-
ваются на эндометрии, обжигая слизистую, что в дальнейшем может стать препятствием для имплантации зиготы.
        Само лечение строится на местной антимикробной терапии: парентеральное ведение антибиотиков при лечении хронического эндометрита малоэффективно.
        Для местной антимикробной терапии необходимо использовать препараты густой консистенции на жировой (масляной) основе, способные длительное время сохраняться в полости матки (в эндометрии) и потому обладаю-
щие пролонгированным действием. Более того, препараты на масляной основе не способствуют дальнейшему разрушению эндометрия в отличие от препаратов на водной основе, которые вызывают мацерацию эндометрия, тем самым способствуя проникновению микроорганизмов в более глубокие слои.
        Лечение субклинического эндометрита должно базироваться на введении в матку небольших объемов лекарст-
венных средств – до 50 мл (не более), потому что препарат, введенный в большем объеме, заполняя полость матки, занесет инфекцию далее – в яйцевод и поспособствует развитию там воспалительного процесса.
        И наконец, важной составляющей лечения эндометрита является стимуляция регенеративных процессов (эпи-
телизации) препаратами, содержащими витамин А, и другими репарантами, предназначенными для внутриматоч-
ного введения.

*    *    *

        Значительным препятствием для успешного осеменения могут стать и гормональные причины – ановуляция и гипофункция желтого тела (диагностируются с помощью УЗИ-сканера). Считается, что процент животных, страдаю-
щих задержкой овуляции в 4–5 раз больше процента животных с кистами яичников. В случае выявления данных патологий необходимо восстановить гормональный статус животного.
        Если корова исправно циклирует, но осеменение оказывается безуспешным, необходимо через сутки после осе-
менения провести УЗИ яичников и выяснить, произошла ли овуляция фолликула. Если через сутки интересующий фолликул обнаружен, а еще через сутки он овулировал, значит, осеменение было проведено преждевременно. Соот-
ветственно, возникает необходимость стимулировать овуляцию в более ранний срок препаратами, стимулирующи-
ми выброс лютеинизирующего гормона (ЛГ) и фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), применением схем син-
хронизации либо осеменять животное позднее.

*    *    *

        Ничуть не менее актуальная, хотя и постоянно игнорируемая проблема воспроизводства, – иммунное беспло-
дие, которое характеризуется появлением не только в течковой слизи, но и в крови коровы спермоантител.
        Все спермоантитела подразделяются:

• на спермолизины (вызывают растворение спермиев),
• спермоагглютинины (вызывают их склеивание),
• спермотоксины (вызывают их гибель),
• спермопреципитины (покрывают поверхность спермия белками, которые он не способен растворить
  и выполнить свою функцию).

        Причинами иммунного бесплодия становятся осеменение коров с воспалительными заболеваниями репродук-
тивного тракта, слишком раннее осеменение коров после отела, травмирование половых путей во время осемене-
ния и сами многократные попытки осеменения.
        Общей составляющей этих, казалось бы, различных факторов является возможность спермиев соприкасаться
с глублежащими тканями в репродуктивных органах коровы (эндометрий либо воспален, либо травмирован, либо
не восстановлен после отела), провоцируя иммунную реакцию. Результатом такой реакции и становится иммунное бесплодие.
        Диагностика иммунного бесплодия основана на применении биологического метода Н.А. Флегматова. Однако
в этом случае допустимо исследовать не только течковую слизь, но и сыворотку крови. Агглютинация (склеивание) спермиев или снижение их активности под воздействием иммунных тел, содержащихся в течковой слизи или сыво-
ротке крови, позволяет поставить диагноз «иммунное бесплодие».
        Что следует предпринять, если иммунное бесплодие диагностировано? Во-первых, не осеменять корову в тече-
ние 2–3 половых циклов. Пропуск одного цикла не даст результата: за этот период антитела к чужеродным белкам не будут выведены из организма. Кроме того, должна восстановиться целостность эндометрия.
        Во-вторых, сменить быка-производителя. Оплодотворение коровы может произойти только в том случае, если титры спермиоагглютининов в ее крови и цервикальной слизи не превышают 1 : 16 (Петров М.А., Дегтярев В.П.). Титр антител к сперме одного и того же быка после многократного осеменения всегда повышен.
        Кроме того, чем более дальним будет родство заменяющего быка с основным быком или с осеменяемой коро-
вой, тем выше шанс на успешное оплодотворение. Поэтому зачастую для осеменения коров с иммунным беспло-
дием используется сперма быков других пород, включая породы мясного направления. Главной целью в данном случае становится сохранение коровы в стаде и обеспечение ее лактации, о племенной ценности потомства речи
не идет.
        Вопрос об эффективности метода нейтрализации спермоантител, циркулирующих в крови коровы, посредством подкожной инъекции спермы быка, на мой взгляд, дискусионен. Краткое описание метода сводится к следующему: в средину фазы полового цикла, на 12–14-е сутки, корове в области холки делают подкожную инъекцию двух спер-
модоз, разведенных миллилитром физраствора. Цель – спровоцировать концентрацию спермоантител в месте инъекции, понизив тем самым их содержание в крови животного.
        Судя по отзывам коллег, метод действенный. Однако возникает вопрос: если корову всё же не удастся оплодо-
творить после инъекции, не послужит ли введенная сперма своеобразной вакциной, которая только увеличит титр спермоантител в ее крови и продлит иммунное бесплодие? Полагаю, следует учесть такую вероятность, размышляя о возможности применения данного метода.
        Однозначно менее рискован метод применения иммуносупрессоров – препаратов кортизола (глюкокртикосте-
роидов), которые снижают собственную иммунную реакцию организма, а следовательно, и негативное воздействие спермоагглютининов. Мой собственный опыт применения препарата «Дексафорт» за 14 суток до предполагаемой охоты оказался успешным.
        Независимо от того, какой метод лечения иммунного бесплодия будет выбран, лечение должно сопровождаться стимуляцией репаративных процессов в тканях матки, ибо, как уже было сказано, данная патология зачастую воз-
никает в результате истончения барьеров между слизистой и содержимым матки.

*    *    *

        Еще одной причиной безрезультатности осеменений могут стать спайкам яичников и непроходимость яйцево-
дов. И если при односторонней спайке или одностороннем сальпингите возможно осеменение на другой яичник, то при двусторонних спайках или двустороннем сальпингите корова останется бесплодной: спаечные процессы в про-
светах яйцеводов не позволят ее осеменить.
        Изменение нормального расположения яичников, в том числе рогов матки, воронки яйцеводов, невозможность воронки яйцевода обхватить яичник дают тот же исход – бесплодие.

*    *    *

        Помимо указанных причин, безрезультатность осеменений может быть вызвана и такими, которые мы не в си-
лах установить. В их числе может быть непальпируемая патология яйцеводов или воронки, врожденная патология репродуктивного тракта (у телок), даже выделение антител на собственные яйцеклетки, что тоже наблюдается у отдельных животных.
        Значительно вредит успеху осеменения специфическая половая инфекция, к тому же, сложно диагностируемая, например, хламидиозы и микоплазмозы. Да и в целом любая инфекция может в решающий момент сыграть нега-
тивную роль.
        Известно, что такие системные заболевания, как кетоз и ацидоз, вызывают изменение состава и свойств теч-
ковой слизи, а также секрета маточных желез, делая их средой, губительной для спермиев и зиготы.
        В числе причин могут оказаться и генетические патологии, и генетическая несовместимость коровы с каким-либо конкретным быком: зиготы от определенных скрещиваний могут не восприниматься ее организмом и быть
нежизнеспособными (гаплотипы фертильности), требуется замена быка.
        Пресловутый человеческий фактор: неграмотное использование гормональных препаратов, применение неверно составленных или несоблюдение верно составленных схем синхронизации.
        Кормовые причины – присутствие в кормах микотоксинов и иных вредных веществ.

*    *    *

        В завершение следует упомянуть и о таких причинах многократных осеменений, которые не связаны с проб-
лемами самого осеменения, но тесно к ним примыкают, поскольку проявляются после того, как оплодотворение состоялось.
        Первая из этих причин – неблагоприятная среда в матке для имплантации зиготы. Она возникает в следующих случаях.
        Во-первых, при наличии воспалительного процесса, причем не только в матке, но и в любом другом органе или части тела: в молочной железе, в кишечнике, на какой-либо конечности – где угодно. Циркулирующие в крови меди-
аторы воспаления вызывают циркуляцию иммунных комплексов, которые негативно воздействуют на последую-
щую имплантацию зиготы.
        Во-вторых, под воздействием различных токсических веществ – микотоксинов, кетоновых тел, продуктов эндо-
генной интоксикации, которые отравляют зиготу в период имплантации.
        В-третьих, вследствие изменения рН среды матки на фоне общего ацидоза и снижения резервной щелочности организма.
        В-четвертых, в связи с изменением структуры маточной ткани (эндометрия) после перенесенного коровой эндо-
метрита. Оно может выражаться либо в отмирании части маточных желез (такой эндометрий будет синтезировать меньшее количество маточного секрета, необходимого для первых дней жизни зиготы) либо в замене эндометрия фиброзной тканью, которая совершенно лишена маточных желез. В обоих случаях имплантации зиготы не произой-
дет, а многократные попытки осеменить животное только вызовут иммунное бесплодие.
        Единственный способ восстановить репродуктивную функцию коровы – пропустить достаточное количество половых циклов и дать эндометрию восстановиться самостоятельно, поскольку восстанавливается он именно в период эстральной фазы (происходит пролиферация клеток маточной ткани).

*    *    *

        Вторая причина многократности осеменений, несмотря на их успешность, – эмбриональная смертность. Даже после имплантации зигота не застрахована от воздействия неблагоприятных факторов. Наиболее характéрный из них – несоответствующий гормональный фон: низкий или, напротив, высокий уровень прогестерона. Нехватка про-
гестерона не позволит эмбриону развиться, а его избыток окажет пагубное токсичное воздействие.
        На первый план в таком случае выходит ранняя и одновременно максимально точная диагностика стельности
и эмбриональной смертности. Ценным инструментом в дополнение к УЗИ-сканеру могут стать специальные тест-системы, такие как IDEXX, способные определить стельность на 28–30-е сутки.
        Принцип действия тест-системы заключается в обнаружении трофобластинов (гликопротеинов стельности) – специфических белков, которые выделяются эмбрионом и, попадая в кровь матери, сигнализируют о зачатии.
И если посредством УЗИ эмбрион не обнаруживается, но одновременно с помощью тест-системы выявляется присутствие трофобластинов, можно сделать вывод о том, что зачатие состоялось, эмбрион имплантировался,
но впоследствии не выжил.

*    *    *

        Как мы видим, существует множество причин безрезультатных осеменений, поэтому в случае появления в ста-
де животных с многократными прохолостами необходим всесторонний комплексный подход к установлению при-
чин их бесплодия. Это, в свою очередь, требует достаточно высокой квалификации зооветеринарных специалистов и индивидуальной работы с проблемными животными.